背景:

中國藥(yao)典2015版中(zhong)只(zhi)有提出隔(ge)(ge)離(li)(li)(li)系(xi)統除(chu)菌(jun)驗(yan)證的(de)標準(zhun)為“用于隔(ge)(ge)離(li)(li)(li)器(qi)(qi)(qi)、實驗(yan)物品(pin)的(de)滅菌(jun)方法應能(neng)達到或(huo)超過使(shi)生(sheng)(sheng)物指示劑下降(jiang)6個對數值的(de)效果”，但并未給出具體(ti)的(de)除(chu)菌(jun)參數及(ji)驗(yan)證方法。其根本原因(yin)(yin)在(zai)(zai)于隔(ge)(ge)離(li)(li)(li)器(qi)(qi)(qi)的(de)除(chu)菌(jun)效果受到多種因(yin)(yin)素的(de)影響，比如氣(qi)體(ti)發(fa)生(sheng)(sheng)器(qi)(qi)(qi)，隔(ge)(ge)離(li)(li)(li)器(qi)(qi)(qi)腔體(ti)結構、除(chu)菌(jun)氣(qi)體(ti)類型、除(chu)菌(jun)時間、除(chu)菌(jun)濃(nong)度(du)、對應的(de)溫(wen)濕(shi)度(du)、壓力等，即使(shi)是(shi)(shi)同一批次生(sheng)(sheng)產的(de)隔(ge)(ge)離(li)(li)(li)器(qi)(qi)(qi)，氣(qi)體(ti)發(fa)生(sheng)(sheng)器(qi)(qi)(qi)也是(shi)(shi)有所不同。PIC/S Isolators used for aseptic processing and sterility testing中(zhong)指出在(zai)(zai)無法證明氣(qi)體(ti)發(fa)生(sheng)(sheng)器(qi)(qi)(qi)的(de)氣(qi)體(ti)除(chu)菌(jun)過程是(shi)(shi)相同的(de)情況下，則(ze)要求將(jiang)氣(qi)體(ti)發(fa)生(sheng)(sheng)器(qi)(qi)(qi)當成不同的(de)設備(bei)對待，也就是(shi)(shi)說(shuo)每1臺(tai)隔(ge)(ge)離(li)(li)(li)器(qi)(qi)(qi)應該進(jin)行單獨的(de)除(chu)菌(jun)循(xun)環開(kai)發(fa)及(ji)驗(yan)證。

隔離器(qi)除(chu)菌循環開發目(mu)的(de)在于確(que)定(ding)隔離器(qi)日常除(chu)菌程(cheng)序中(zhong)(zhong)所必需的(de)過程(cheng)控制參數(shu)。開發測試(shi)項目(mu)至少包括以(yi)下幾個方面，隔離器(qi)中(zhong)(zhong)除(chu)菌試(shi)劑(ji)的(de)分布以(yi)及除(chu)菌時間(jian)和(he)除(chu)菌程(cheng)序完成以(yi)后的(de)除(chu)菌試(shi)劑(ji)排空時間(jian)。

測試原理:

除(chu)菌循環開發：

1.氣(qi)體(ti)分布(bu)性(xing)：在隔離(li)器內布(bu)置化學指示劑，尤其(qi)注意部分依靠氣(qi)體(ti)被(bei)動擴散(san)的(de)區域(yu)或(huo)者(zhe)容易被(bei)遮擋的(de)區域(yu)，用于檢(jian)測除菌氣(qi)體(ti)的(de)分布(bu)性(xing)。

2.隔離(li)器(qi)除(chu)菌參數(shu)確定(ding)：在除(chu)菌氣體分布優(you)差的位置進行生物指(zhi)示計(ji)布點。設置合適的除(chu)菌濃度、溫度、濕度，過長(chang)的除(chu)菌時間(jian)等除(chu)菌參數(shu)，采用部(bu)分陰性法或(huo)存活(huo)曲線法測定(ding)生物指(zhi)示劑在該條件(jian)下(xia)的D值(zhi)。則空(kong)載情(qing)況下(xia)隔離(li)器(qi)的優(you)終除(chu)菌時間(jian)=6倍*生物指(zhi)示劑的D值(zhi)*保險(xian)系數(shu)S_空，S_空大于1.0.滿載情況(kuang)下(xia)，隔(ge)離器的優終除菌時間=6倍(bei)*生物指示劑的D值*保險系數S_滿，S_滿(man)大(da)于S_空。該除(chu)菌時間優(you)終還需(xu)要通過除(chu)菌驗(yan)證，否則需(xu)調整保險系數。

3. 通(tong)風排殘時間確定：通(tong)風后應保證(zheng)濃度低(di)于職業接觸限值，可用電化學傳感器或化學指示劑(ji)檢測。

除菌驗證：

運(yun)行(xing)一個滅菌循環，以確認滅菌循環各階段實際(ji)運(yun)行(xing)值與其設定(ding)值是否相符(fu)。根據隔離器的內(nei)腔容(rong)積進行(xing)生物指(zhi)示計布(bu)點，布(bu)點原則為5個/m3，優少(shao)布5個點，均(jun)勻(yun)分(fen)布于內表(biao)面(mian)，尤其在氣體除(chu)菌(jun)(jun)(jun)(jun)劑分(fen)布較低的位置(zhi)。啟動隔離器，先對(dui)腔體內部進行(xing)除(chu)濕(shi)和汽化單元進行(xing)預熱，按(an)照(zhao)除(chu)菌(jun)(jun)(jun)(jun)運行(xing)參數(shu)(shu)運行(xing)，End進行(xing)通風(feng)排殘。滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)結束后取出測試樣本，均(jun)放到相應(ying)培(pei)養(yang)基中，在合適條(tiao)件(jian)下(xia)培(pei)養(yang)，觀察微生(sheng)物(wu)(wu)生(sheng)長結果。未經過滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)周期的生(sheng)物(wu)(wu)指(zhi)示(shi)劑同條(tiao)件(jian)下(xia)培(pei)養(yang)作為陽性對(dui)照(zhao)。將不含生(sheng)物(wu)(wu)指(zhi)示(shi)劑的TSB培(pei)養(yang)物(wu)(wu)作為陰性對(dui)照(zhao)同條(tiao)件(jian)培(pei)養(yang)。所采用的滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)(jun)參數(shu)(shu)及循環程序應(ying)能使隔離器內表(biao)面(mian)或無菌(jun)(jun)(jun)(jun)器具(ju)暴露(lu)的外表(biao)面(mian)上高耐受性的生(sheng)物(wu)(wu)指(zhi)示(shi)劑下(xia)降6個對(dui)數(shu)(shu)單位，并具(ju)有重現性。隔離器內物(wu)(wu)品和設備滿(man)載時需(xu)要用更多的生(sheng)物(wu)(wu)指(zhi)示(shi)劑進行(xing)試驗。

方法參考:

<中國藥典>2015版  9206無菌檢查用隔離系統驗證指導原則

<中國藥典>2015版 通則 1421

PIC/S Isolators used for aseptic processing and sterility testing

USP<1208>Sterility Testing-Validation of Isolator System/General informance

PDA TR34 Design and Validation of Isolator Systems for the manufacturing and testing of Health care Products.

JB/T 20175-2017 無菌隔離(li)器

樣(yang)品(pin)要求:

除菌循環開發及驗證：現場或隔離(li)器寄送