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過(guo)氧(yang)化氫(qing)在(zai)觸(chu)媒(mei)的存在(zai)下(xia),發(fa)生類芬頓反(fan)應,產生高活(huo)性氫(qing)氧(yang)自由(you)基可以有效的、非選擇性的裂解(jie)DNA/RAN的單鏈和雙鏈,過(guo)氧(yang)化氫(qing)最(zui)終分解(jie)為氧(yang)氣和水。
產品(pin)特點(dian):
1、非接觸法適(shi)用于實驗室空間清除核酸殘(can)留,有效(xiao)地防止生(sheng)物物質交叉污染(ran)
2、接觸法適用于不宜整體清(qing)除區域物(wu)體表面及內部清(qing)除
3、低濃度過氧化氫
4、無(wu)殘留、無(wu)腐蝕作用(yong)
5、核酸清除效(xiao)能和微生物消殺(sha)效(xiao)能可(ke)驗(yan)證
主要(yao)成分:
組(zu)分A:化學裂解觸媒(mei)
組(zu)分B:6.8%-7.8%過氧化氫
使用(yong)方法(fa):
將組分(fen)(fen)A和組分(fen)(fen)B按1:1比例(li)充分(fen)(fen)混合(he)
用于局部物體表面清潔(接觸法):
用噴霧(wu)瓶將AB混合物噴霧(wu)至(zhi)所需(xu)區(qu)域(yu),作用5分(fen)鐘,擦(ca)拭干凈
用于移液槍清潔(接觸法)
根據制造商的(de)說明從移液器上取下(xia)套筒和套柄。從套柄內取下(xia)密封件和墊圈,然后(hou)將套筒和套柄在(zai) mPCR-I 溶液中浸泡一分(fen)鐘。用水徹底沖(chong)洗,然后(hou)重新(xin)組裝移液器
用于整個實驗室空間清潔(非接觸法):
通過專用干(gan)霧發(fa)生(sheng)器(qi)將(jiang)AB混(hun)合物噴霧至密閉實驗室內,噴藥(yao)量為(wei)(wei)6-7ml/m3。作用時(shi)間為(wei)(wei)180-240分鐘。作用時(shi)間完成(cheng)后, 通風排殘。
清除(chu)效率驗證實驗:
DAN清除驗證實驗
以(yi)CMV /CMV-GFP質粒菌(jun)液分別(bie)提(ti)取(qu)純化(hua)CMV (內參)及GFP DNA,稀釋(shi)為(wei)2 *107 CP/μl,GFP DNA10μl加注(zhu)至測(ce)試不銹鋼片上,自然(ran)干燥,分為(wei)浸泡法(fa)(fa)(圖(tu)1)、手動(dong)(dong)噴霧(wu)法(fa)(fa)(圖(tu)2)和整(zheng)體實(shi)驗(yan)室自動(dong)(dong)噴霧(wu)法(fa)(fa)(圖(tu)3)三組(zu),每(mei)組(zu)均(jun)由(you)未經mPCR-I清除劑處理的陽性對照樣品(pin)(n=3,P1-P3), mPCR-I清除劑處理的測(ce)試樣品(pin)(n=3,T1-T3),采(cai)用熒光定量PCR(SYBR Green法(fa)(fa))檢測(ce),結(jie)果顯(xian)示三種清除方法(fa)(fa)DNA清除效率均(jun)﹥95%。
圖1 浸泡(pao)法(mPCR-I 20μl)熒(ying)光定(ding)量PCR結果
圖3整體(ti)實驗(yan)室自動噴霧法(fa)(mPCR-I 7ml/m3)熒光定(ding)量PCR結果
RNA清除驗證實(shi)驗
樣品準備:
實驗組(SP1,SP2,SP3)和(he)陽性組(PC1,PC2): 取(qu)5個無菌(jun)塑料平(ping)皿(min),使得每(mei)平(ping)皿(min)含有(you)500cps 2019-nCov病(bing)毒RNA。
陰性組(NC):取1個無(wu)菌塑料(liao)平(ping)皿,用移液槍(qiang)取0.5mL稀釋液均勻點滴在塑料(liao)平(ping)皿中,通風直至液體完全干燥。
實(shi)驗過程:
機(ji)器除菌(jun)循環程(cheng)序為(wei)噴藥量7g/m3 ,維持(chi)時(shi)間(jian)為(wei)180分(fen)鐘。
實驗(yan)組(zu)SP1、SP2、SP3及陰性組(zu)NC暴露在除菌循(xun)環(huan)中,循(xun)環(huan)結束后(hou),用普通病毒采樣(yang)(yang)管配套拭子在各樣(yang)(yang)品的表面皿中采樣(yang)(yang)(SP1,SP2,SP3,NC,PC1和(he)PC2),放入保(bao)存液(ye)中。按照日常(chang)新(xin)冠病毒標本檢測程序(xu)進行qPCR檢測。實驗(yan)結果見圖4
圖4 定量(liang)新冠(guan)病毒(du)RNA qPCR擴增曲線(xian)
圖5 Ct值(zhi)和初始(shi)模板(ban)數對數值(zhi)的線(xian)性關(guan)系
RNA清除效能:大(da)于(yu)99%*
細菌芽孢清除實驗
VHP生物指示劑(ji)(VHP BI): 不銹鋼載(zai)體,特衛(wei)強包裝,嗜熱脂肪(fang)芽胞(bao)桿菌,芽胞(bao)數10^5. 實(shi)驗(yan)組(zu): 3個(ge) VHP BI,陽性組(zu), 1個(ge)VHP BI。
機(ji)器(qi)除菌循環程(cheng)序(xu)設定(ding)7g/m3,維(wei)持(chi)時間180分鐘。
除菌循環(huan)完成后,無(wu)菌操作轉移(yi)不銹鋼(gang)載(zai)體至恢復培養(yang)基,55°C培養(yang),實(shi)驗組全(quan)部無(wu)生(sheng)長,陽(yang)性組混濁,變色。
產品規格:
產(chan)品名(ming)稱(cheng)
型(xing)號
規格
建(jian)議用量
儲存(cun)
有效(xiao)期
核酸(suan)清除(chu)劑(ji)
mPCR-I
A瓶(ping)1L
B瓶(ping)1L
見說明書
密封、避光、置(zhi)于陰涼處
24個(ge)月
應用(yong)場景:
疾控中心檢測室(shi) 衛生院實驗(yan)(yan)室(shi) PCR實驗(yan)(yan)室(shi)